王会芳，符美英，肖敏，张淼，陈绵才，曾向萍*
(海南省农科院植物保护研究所，农业农村部海口作物有害生物科学观测实验站，海南省植物病虫害防控重点实验室)
摘要：剑麻溃疡病是近年来在剑麻上发生的一种新病害，为明确剑麻溃疡病的致病菌，本研究通过组织分离纯化和致病性鉴定分离得到致病菌株JM-HN01，运用形态学和分子生物学技术将该菌株鉴定为新暗色柱节孢(Neoscytalidiumdimidiatum)。生物学特性研究表明，该菌菌丝生长的最适生长温度为35.0℃，最适pH值为7.0；完全光照条件下有利于菌丝的生长；葡萄糖为碳源最有利于菌丝生长，其次为果糖和蔗糖；牛肉浸膏和胰蛋白胨2种氮源最有利于菌丝生长。本研究给剑麻溃疡病发病规律及防控措施的制定提供一定的理论依据。
关键词：剑麻；溃疡病；病原鉴定；生物学特性
剑麻(Agavesisalana)，隶属于龙舌兰属，是多年生硬质叶纤维作物，剑麻纤维具有质地坚韧、拉力强、较高的耐酸碱、耐磨及耐腐蚀等特性，在一些工业生产中具有不可替代的用途(黄富宇，；梁宏合等，)，广泛运用于运输、渔业、冶金、石油等行业。剑麻原产墨西哥，现主要在非洲、亚洲、拉丁美洲等地种植，是当今世界应用范围最广、用量最大的一种硬质纤维。近年来，剑麻在医药、纺织、沼气和肥料等方面的应用不断发展，用量也进一步扩大。在中国，广东、广西和海南一带是剑麻主要产地。据统计，年中国剑麻种植面积为hm2，剑麻纤维总产量为8.17×kg，加工产值达18亿元(孙娟等，)。
年8月，在广西省南宁附近的广西农垦国有东风农场发现一种剑麻新发病害，此后，该病害在距离不远的广西农垦国有山圩农场剑麻基地大面积发生，部分田块发病率达50%以上。受害麻片纤维变色黑腐，严重影响了剑麻叶片的品质和产量，国内外对该病害鲜有报道，根据该病病斑症状和发病特点，暂定名为剑麻溃疡病。本研究对该病害的症状进行观察，分离并纯化病原菌，并进行柯氏法则验证，对病原菌进行了形态学鉴定和rDNA-ITS分子鉴定，并对该病原菌的生物学特性进行了研究，明确剑麻溃疡病的病原菌，为剑麻溃疡病发病规律及防控措施的制定提供一定的理论依据。
1结果与分析1.1剑麻溃疡病症状剑麻溃疡病在田间发病初期病叶上会形成浅褐色、突出叶表面的点状小斑(图1A)，随后病斑逐渐扩大，表面粗糙开裂，有的呈圆形，有的形状不规则(图1B；图1C)；发病严重的叶片，病斑相互连结成片，表面开裂粗糙，呈灰白色，空气湿度大的情况下，部分病斑的边缘呈现水渍状(图1D)。
图1剑麻溃疡病症状
注:A，B，C:发病初期症状；D:发病中后期症状
Figure1Symptomsofsisalcankerdisease
Note:A，B，C:Earlysymptoms；D:Medium-termorLatesymptoms
1.2病原菌致病性测定（柯氏法则验证）将分离到的菌株JM-HN01喷雾接种于轻微刺伤的剑麻离体叶片表面，接种12d后叶片开始发病，部分病斑出现水渍状病斑，随着接种时间的延长，病斑不断扩大，形成灰色溃疡病斑，开裂；发病后期，叶片病斑表皮部分或完全开裂。从接种发病的组织部位可重新分离到与接种病原菌相同的菌株，而对照叶片不发病，证明所接种菌株JM-HN01为剑麻溃疡病的病原菌。
1.3病原菌形态特征与培养性状显微观察显示，病原菌JM-HN01菌丝表面光滑，有隔膜及分枝；有的为无色、柱状且较窄，有的呈淡褐色，较宽。分生孢子大多呈链状排列，单胞或双胞，多数为单胞，其形状和大小不一，主要有两种类型节孢子：一种由菌丝断裂而成，无色，薄壁，圆柱形，大小2.0~6.0μm×5.0~13.0μm；另一种，由菌丝厚垣化断裂而成，浅棕色至深褐色，厚壁，椭圆形、近圆形或葫芦形，大小为4.0~9.0μm×3.0~8.0μm(图2B；图2C)。该菌在PDA培养基上气生菌丝发达，生长速度快，菌丝体部分埋生或表生，起初菌落颜色为白色，逐渐变至灰色，后期变为暗橄榄色、黑褐色(图2A)。该菌丝形态与培养形状与已报道的新暗色柱节孢(Neoscytalidiumdimidiatum(Penz.)CrousSlippers)一致(Mohdetal.,;Fernández-Herreraetal.,)，因此，初步将剑麻溃疡病病原菌鉴定为新暗色柱节孢(Neoscytalidiumdimidiatum(Penz.)CrousSlippers)。
图2剑麻溃疡病病原菌形态
注:A:PDA培养基上的菌落形态；B，C:孢子链和节孢子
Figure2Morphologyofpathogenofsisalcanker
Note:A:ColonymorphologyonPDAmedium;B,C:Sporeschainsandarthrospore
1.4剑麻溃疡病病原菌的分子生物学鉴定
1.4.1供试菌株ITS片段测序及序列分析
利用真菌rDNA-ITS扩增的通用引物ITS1和ITS4(Whiteetal.，)在供试菌株扩增出1条的特异性条带(图3)，测序结果显示为bp长度。将序列信息提交NCBI网站(序列号MH)并进行BLAST比对，结果表明JM-HN01与编号MF.1、KF.1的菌株(Neoscytalidiumdimidiatum)相似性为99%，序列覆盖度为99%。由此可以进一步确定，该病的病原菌为N.dimidiatum，属葡萄座腔菌科(Botryosphaeriaceae)。
图3病原菌JM-HN01ITS序列扩增结果
注:M:DLDNAMarker；1，2:JM-HN01的ITS扩增条带
Figure3ResultsofITSamplificationofpathogenicJM-HN01Note:M:DNAMarker；1，2:ITSamplifiedbandsofJM-HN01
1.4.2系统发育树构建
下载与供试菌株的序列同源度较高的序列构建系统发育树。结果表明，JM-HN01与学名为N.dimidiatum的所有菌株聚为一个分支，而与该属其它种和其它相似相近种，都分属于不同的分支。结合前述形态学鉴定结果，可以进一步证明JM-HN01与N.dimidiatum隶属于同一个种，属丝孢菌纲(Hyphomycetes)、丝孢菌目(Hyphomycetales)、丛梗孢科(Moniliaceae)、小柱孢属(Neoscytalidium)，其有性世代为圆酵母样亨德逊霉(Hendersonulatoruloidea)(St-GermainandSummerbell，；王会芳等，)
图4基于ITS序列的新暗色柱节孢及圆柱菌属内种的系统发育树
Figure4PhylogenetictreeofNeoscytalidiumsp.andScytalidiumsp.basedonITSsequences
1.5剑麻溃疡病病原菌生物学特性1.5.1温度对菌丝生长的影响
剑麻溃疡病菌JM-HN01的生长温度范围较宽，在10.0℃~40.0℃下均可生长，其中10.0℃~15.0℃生长速度较慢；最适生长温度为35.0℃，培养72h后菌落直径达74.00mm。方差分析显示，35.0℃和40.0℃下显著大于其它温度处理的生长速度(图5)。
图5不同温度对菌丝生长的影响
注:图中的小写字母表示在P≤0.01水平上差异显著
Figure5Theinfluenceofdifferenttemperatureonmycelialgrowth
Note:ThesmalllettersinthefigureindicatesignificantdifferencesatP≤0.01level
1.5.2光照对菌丝生长的影响
不同光照条件处理结果表明，光照有利于剑麻溃疡病菌菌丝的生长，在完全光照培养的条件下，72h后菌落直径达58.33mm，显著大于全黑暗条件下菌丝生长速度，而12h光暗交替条件下的生长速度介于两者之间(图6)。
图6光照对菌丝生长的影响
注:图中的小写字母表示在P≤0.01水平上差异显著
Figure6Theinfluenceofilluminationonmycelialgrowth
Note:ThesmalllettersinthefigureindicatesignificantdifferencesatP≤0.01level
1.5.3pH对菌丝生长的影响
剑麻溃疡病菌的菌丝在pH值在4.0~10.0之间均可生长，当pH值为7.0时，菌株的生长速度最快，72h后菌落直径可达51.67mm；其在pH为4.0和10.0时生长非常缓慢。分析显示，pH值为6.0和7.0时的菌丝生长速度显著大于其它各处理(图7)。
图7pH对菌丝生长的影响
注:图中的小写字母表示在P≤0.01水平上差异显著
Figure7TheinfluenceofpHonmycelialgrowth
Note:ThesmalllettersinthefigureindicatesignificantdifferencesatP≤0.01level
1.5.4碳源对菌丝生长的影响
剑麻溃疡病菌在7种碳源培养基上均可生长，其中以葡萄糖为碳源的培养基为最适培养基，培养72h后其菌落直径达69.67mm，显著大于其它各个处理的菌落直径；其次为以果糖和蔗糖为碳源的培养基，而以甘露醇为碳源的培养基上生长速度最慢，培养72h后菌落直径仅为33.67mm(图8)。
图8不同碳源对菌丝生长的影响
注:图中的小写字母表示在P≤0.01水平上差异显著
Figure8Theinfluenceofdifferentcarbonsoucesonmycelialgrowth
Note:ThesmalllettersinthefigureindicatesignificantdifferencesatP≤0.01level
1.5.5氮源对菌丝生长的影响
除了以尿素为氮源的培养基外，剑麻溃疡病菌在其它6种氮源培养基上均可较好生长。在以牛肉浸膏和胰蛋白胨为氮源的培养基上菌丝的生长速度最快，培养72h后的菌落直径分别为62.33mm和62.00mm，生长速度显著大于其它氮源培养基；而以氯化铵为氮源的培养基最不适合该菌生长，相比接种时菌落直径仅增大1mm(图9)。
图9不同氮源对菌丝生长的影响
注:图中的小写字母表示在P≤0.01水平上差异显著
Figure9Theinfluenceofdifferentnitrogensoucesonmycelialgrowth
Note:ThesmalllettersinthefigureindicatesignificantdifferencesatP≤0.01level
1.5.6湿度对孢子萌发的影响
剑麻溃疡病菌的孢子在相对湿度为93.0%~.0%时，随着湿度的增加，萌发率也逐渐提高；湿度为%时萌发率达到最高，为98.5%，显著高于其它各处理；当相对湿度低于93.0%时该菌孢子不能萌发(图10)。
图10不同湿度对孢子萌发的影响
注:图中的小写字母表示在P≤0.01水平上差异显著
Figure10Theinfluenceofdifferenthumidityonsporegeimination
Note:ThesmalllettersinthefigureindicatesignificantdifferencesatP≤0.01level
1.5.7剑麻溃疡病菌致死温度和时间测定
剑麻溃疡病菌经处理后，在45.0℃~65.0℃下的各处理均可生长；当处理温度为70.0℃时，只有在处理时间为10.0min时，PDA培养皿上有菌丝生长；当温度为70.0℃、时间为20min和30min时，各处理均不能生长(表1)。
表1病原菌致死温度和时间测定
Table1Lethaltemperatureandtimeofthepathogen
处理温度(℃)Processing
处理时间(min)Processing
菌落是否生长
Whetherthe
处理温度(℃)处理时间(min)菌落是否生长
ProcessingProcessingtime(min)Whetherthe
temperature(℃)
time(min)
colonyisgrowing
temperature(℃)
colonyisgrowing
10
+
10
+
45
20
+
60
20
+
30
+
30
+
10
+
10
+
50
20
+
65
20
+
30
+
30
+
10
+
10
+
55
20
+
70
20
-
30
+
30
-
2讨论剑麻溃疡病是剑麻生产上一种新病害，本研究依据形态学观察和ITS序列分析，将诱发剑麻溃疡病的病原菌鉴定为新暗色柱节孢(N.dimidiatum)。新暗色柱节孢是一个新种组合，由Crous等()在研究葡萄座腔菌科(Botryosphaeriaceae)的18个属个菌株的系统发育关系时重新建立。该菌最早由Nattrass于年发现并描述，同时定名为Hendersonulatoruloidea，之后陆续有其它该菌致病的相关报道，以致改进的定名在学术界也一直备受争议(Sigleretal.,)。根据该菌的同等无性型Scytalidiumdimidiatum，Sutton和Dyko()将其种名更改为Nattrassiamangiferae。Farr等()认为Nattrassiamangiferae和Scytalidiumdimidiatum均属于壳梭孢属，是通过进化分析得到结论，因此为该菌引入了一个新的种名：Fusicoccumdimidiatum。Phillips等()研究葡萄座腔菌科时，认为Scytalidiumhyalinum与Neoscytalidiumdimidiatum是同物异名。
新暗色柱节孢是一种分布广泛的暗色丝状真菌，可为害多种作物。Lan等()表明广东省从化市和云浮市的火龙果褐斑病(BrownSpotDisease)是由该病菌引起。同年，Chuang等()也说明台湾火龙果溃疡病(StemCankerDisease)由其引起。易润华等()、戴俊等(，中国南方果树，46(1):78-82)分别对广东、海南火龙果溃疡病进行了病原菌鉴定以及生物学特性的研究，由此更加确认了火龙果溃疡病的病原为新暗色柱节孢(Neoscytalidiumdimidiatum)。该病菌可为害桃树、苹果树、麻风树、李树、桑树、芒果树、无花果树、桉树及合欢属、柑橘属、悬铃木属等的植物，引起植物患溃疡病、梢枯病、流胶病、腐烂病等，其在北美洲、南美洲、非洲、东南亚等地均有该病菌分布的报道(Lacazetal.,;Morris-Jonesetal.,)。同时，也有该菌危害人类的报道(Polizzietal.,)。该病原菌主要分布在热带、亚热带地区，在北美洲、南美洲、非洲、东南亚等地均有分布(Lacazetal.,；Morris-Jonesetal.,;易润华等,;戴俊等,,中国南方果树,46(1):78-82)。
不同的温度、pH值、光照及碳源和氮源条件对剑麻溃疡病病原菌新暗色柱节孢丝生长及其孢子萌发均产生影响。本研究结果表明，高温、高湿环境条件下利于剑麻溃疡病病原菌菌丝生长和分生孢子的萌发，这与该病害在台风季节过后更容易出现暴发和流行的现象相吻合。本研究首次从广西剑麻园发生溃疡病的病样上成功分离到致病菌，并对其进行了生物学特性的研究，研究结果可为了解该病害发病条件和进行防控提供参考。针对该病害，有效的防治措施还需进一步的研究。
3材料与方法3.1病害症状观察及样本采集年8月到广西省南宁市武鸣区广西农垦国有东风农场剑麻种植基地(23°3158"N，°2522"E)，调查病害发生情况以及其发病症状，采集具有典型发病症状的样本2份，于实验室内常规镜检观察并在PDA培养基上进行常规组织分离，经多次边缘纯化培养后，获得1株代表性菌株，编号JM-HN01。菌株转入PCA试管斜面培养，于4℃冰箱中保存备用。
3.2病原菌致病性测定采用孢子喷雾接种法(方中达,,中国农业出版社,pp.46-50,-)进行致病性测定。将纯化保存的JM-HN01菌株进行转接活化，活化后的菌株接种至多个PDA培养基上，28.0℃培养3d左右，待菌丝长满平板，即用无菌水冲洗培养皿，配制浓度为约个孢子/L的悬浮液。用消毒后的细针轻轻刺伤剑麻叶片，然后用孢子悬浮液对准叶片的伤口进行喷雾，直到有水滴流下为止，次日傍晚，重复喷雾1次。
对照为喷无菌水的处理，每处理重复3次。将接种完后的剑麻植株放置于人工气候箱中(RH≥95%)，温度保持在28.0℃~32.0℃，每天观察并记录发病情况。待发病后，取发病样本进行镜检，并进行组织分离。
3.3病原菌形态学观察
将采集的病叶置于密闭保鲜盒，采用无菌湿纸巾进行保湿。保湿1~3d后，刮取病斑表面菌丝及少量叶片组织，在光学显微镜下进行观察；对在组织分离获得的菌株制作临时玻片，观察培养物形态特点。
3.4病原菌ITS序列分析
3.4.1病原菌DNA的获得
将活化后的JM-HN01菌株接种于PDA平板上，培养3~4d后，收集平板上菌丝备用。将菌丝干燥，用液氮研磨成粉，分别装于离心管中，每管0.10~0.20g，-20.0℃保存备用。利用天根生化科技有限公司生产植物总DNA提取试剂盒提取该菌株DNA。
3.4.2rDNA-ITS的扩增
利用真菌rDNA-ITS扩增的通用引物ITS1和ITS4(Whiteetal.,)(由上海生物工程有限公司合成)扩增获取的DNA。扩增体系：DNAbuffer2?L；2×TaqPCRMastermix(nova)12.5?L；引物各1?L；灭菌ddH2O8.5?L，共25?L。反应条件：94.0℃预变性10min；94.0℃变性30s，55.0℃退火30s，72.0℃延伸50s，设30个循环；72.0℃延伸10min。
3.4.3PCR产物的回收、测序及比对
采用来自天根生化科技有限公司生产的琼脂糖凝胶回收试剂盒来进行回收纯化，按使用说明书操作。将回收后的PCR产物直接交由上海生物工程有限公司测序，并将测序得到的结果与GenBank中登录的数据进行BLAST比对。从GenBank数据库中下载相关种属菌株的ITS序列，用Mega7构建进行同源性分析。
3.5病原菌生物学特性测定
3.5.1测定温度对菌丝生长影响
用直径5mm打孔器打取菌块，接种于PDA平板培养基的中央，分别于10.0、15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0℃条件下进行培养，72h后，用十字交叉法对菌落直径进行测量，每个处理设3次重复。
3.5.2测定光照条件对菌丝生长的影响
将接有菌饼(直径5mm)的PDA平板置于分别设置光照条件为全光照、12h光暗交替和全黑暗的28.0℃培养箱，72h后，十字交叉法测量每个平板上的菌落直径。
3.5.3测定pH对菌丝生长的影响
用1mol/LNaOH和HCl溶液分别调节PDA培养基的pH为4、5、6、7、8、9、10等7个不同酸碱度，分别接种菌饼(直径5mm)后置于28.0℃培养。72h后，十字交叉法测量每个平板上的菌落直径。
3.5.4测定碳源对菌丝生长的影响
以察氏培养基(Czapek–DoxMediu)作为基础培养基，分别用等量的葡萄糖、麦芽糖、甘露糖醇、木糖、乳糖、果糖代替蔗糖作为培养基的碳源。接种后于28.0℃下恒温培养。72h后，十字交叉法测量每个平板上的菌落直径。
3.5.5测定氮源对菌丝生长的影响
以察氏培养基作为基础培养基，分别用氯化铵、牛肉浸膏、硫酸铵、胰蛋白胨、尿素、甘氨酸等量替换硝酸钠作为培养基的氮源。接种后于28.0℃下恒温培养，72h后，十字交叉法测量每个平板上的菌落直径。
3.5.6测定湿度对孢子萌发的影响
取50μL孢子悬浮液(浓度约为1×个/mL)均匀涂抹在玻片上，待无菌风吹干，放入密封塑料保鲜盒内，然后用不同浓度的甘油来保持内部相对湿度(Wheeleretal.,)。分别设置相对湿度为70%、75%、80%、85%、90%、93%、95%、98%和%，共9个处理。孢子萌发率测定方法参照Fernando等()。培养5d后无菌水洗脱玻片上的孢子，制成1×个/mL的孢子悬浮液。在干净的玻片上覆盖一层PDA培养基，随后将50μL孢子悬浮液分散在玻片上，将玻片置于培养皿中培养，底部以湿润滤纸保湿。24h后制成临时玻片，观察孢子萌发情况，计算孢子萌发率。
3.5.7致死温度和时间测定
用5mm打孔器在已培养5~7d的平板上打取菌饼，将其放入含有2mL无菌水的试管内，每个温度3支试管，分别将每组试管置于60.0℃、65.0℃和70.0℃的恒温水浴中，每个试管的水浴时间设为10、20和30min。处理时间完成后，迅速将试管冲水冷却，随后将菌饼分别接入PDA培养基，28.0℃培养，24h后观察菌落是否生长。
3.5.8数据处理
运用DPS软件对试验数据进行处理与统计分析。
参考文献：
ChuangM.F.,NiH.F.,YangH.R.,ShuS.L.,LaiS.Y.,andJiangY.L.,,Firstreportofstemcankerdiseaseofpitaya(HylocereusundatusandH.polyrhizus)causedbyNeoscytalidiumdimidiatuminTaiwan,PlantDis.,96(6):.
CrousP.W.,SlippersB.,WingfieldM.J.,RheederJ.,MarasasW.F.O.,PhilipsA.J.L.,AlvesA.,BurgessT.,BarberP.,andGroenewaldJ.Z.,,PhylogeneticlineagesintheBotryosphaeriacea,Stud.Mycol.,55:-.
FarrD.F.,ElliottM.,RossmanA.Y.,andEdmondsR.L.,,Fusicoccumarbutisp.nov.causingcankersonPacificmadroneinwesternNorthAmericawithnotesonFusicoccumdimidiatum,thecorrectnameforScytalidiumdimidiatumandNattrassiamangiferae,Mycologia,97(3):-.
Fernández-HerreraE.,Moreno-SalazarS.F.,Rentería-MartínezM.E.,Arratia-CastroA.A.,andVillar-LunaE.,,Neoscytalidiumdimidiatum:causalagentofdiebackinFicusbenjaminaL.inMexico,Rev.ChapingoSer.Hortic.,23(3):-.
FernandoT.H.P.S.,JayasingheC.K.,andWijesunderaR.L.C.,,Factorsaffectingsporeproduction,germinationandviabilityofColletotrichumacutatumisolatesfromHeveabrasiliensis,Mycol.Res.,(6):-.
HuangF.Y.,,ProductionanddevelopmentalmeasuresforsisalinGuangxi,RedaiNongyeGongcheng(TropicalAgriculturalEngineering),34(4):-.(黄富宇,,广西农垦剑麻产业发展现状及对策,热带农业工程,34(4):-.)
LacazC.S.,PereiraA.D.,Heins-VaccariE.M.,CucéL.C.,BenattiC.,NunesR.S.,deMeloN.T.,deFreitas-LeiteR.S.,andHernández-ArriagadaG.L.,,OnychomycosiscausedbyScytalidiumdimidiatum.Reportoftwocases.Reviewofthetaxonomyofthesynanamorphandanamorphformsofthiscoelomycete,Rev.Insti.Med.Trop.SaoPaulo,41(5):-.
LanG.Q.,HeZ.F.,XiP.G.,andJiangZ.D.,,FirstreportofbrownspotdiseasecausedbyNeoscytalidiumdimidiatumonHylocereusundatusinGuangdong,Chinesemainland,PlantDis.,96(11):-.
LiangH.H.,DuG.D.,andWangC.T.,,ResearchprogressonmaindiseasesandinsectpestsofsisalinChina,GuangdongNongyeKexue(GuangdongAgriculturalSciences),39(22):84-87.(梁宏合,杜国冬,王春田,,我国剑麻主要病虫害研究进展,广东农业科学,39(22):84-87.)
MohdM.H.,SallehB.,andZakariaL.,IdentificationandmolecularcharacterizationsofNeoscytalidiumdimidiatumcausingstemcankerofred-flesheddragonfruit(Hylocereuspolyrhizus)inMalaysia,J.Phytopathology,(11-12):-.
Morris-JonesR.,YoungchimS.,HextallJ.M.,GomezB.L.,Morris-JonesS.D.,HayR.J.,CasadevallA.,NosanchukJ.D.,andHamiltonA.J.,,Scytalidiumdimidiatumcausingrecalcitrantsubcutaneouslesionsproducesmelanin,J.Clin.Microbiol.,42(8):-.
PhillipsA.J.L.,AlvesA.,AbdollahzadehJ.,SlippersB.,WingfieldM.J.,GroenewaldJ.Z.,andCrousP.W.,,Thebotryosphaeriaceae:generaandspeciesknownfromculture,Stud.Mycol.,76(1):51-.
PolizziG.,AielloD.,VitaleA.,GiuffridaF.,GroenewaldJ.Z.,andCrousP.W.,,Firstreportofshootblight,cankerandgummosiscausedbyNeoscytalidiumdimidiatumoncitrusinItaly,PlantDis.,93(11):.
SiglerL,SummerbellR.C.,PooleL.,WiedenM.,SuttonD.A.,RinaldiM.G.,AguirreM.,EstesG.W.,andGalgianiJ.N.,,InvasiveNattrassiamangiferaeinfections:casereport,literaturereview,andtherapeuticandtaxonomicappraisal,J.Clin.Microbiol.,35(2):-.
St-GermainG.,andSummerbellR.,eds.,,Identifyingfilamentousfungi,1stedition,Korea:StarPublishingCompany,Belmont,CA,pp.8,17,.
SunJ.,ZhongX.,ZhengH.Y.,MaC.Y.,ChenH.L.,andYiK.X.,,OverviewandstrategyresearchofsisalindustryinChina,ZhongguoRedaiNongye(ChinaTropicalAgriculture),(5):27-32.(孙娟,钟鑫,郑红裕,马晨雨,陈河龙,易克贤,,我国剑麻产业概况及对策研究,中国热带农业,(5):27-32.)
SuttonB.C.,andDykoB.J.,,RevisionofHendersonula,Mycol.Res.,93(4):-.
WangH.F.,RuiK.,ZengX.P.,XiaoM.,FuM.Y.,andChenM.C.,,InvestigatingreportofdiseasesandidentificationofmajorpathogensonAgavesisalana,NanfangNongyeXuebao(JournalofSouthernAgriculture),49(10):-.(王会芳,芮凯,曾向萍,肖敏,符美英,陈绵才,,剑麻病害调查及其主要病原种类鉴定,南方农业学报,49(10):-.)
WheelerM.J.,RussiS.,BowlerM.G.,andBowlerM.W.,,Measurementoftheequilibriumrelativehumidityfor
